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支原體(mycoplasma):又稱霉形體,為目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡單的原核生物。支原體細(xì)胞中唯一可見的細(xì)胞器是核糖體。大小一般在0.3-0.5um之間,缺乏細(xì)胞壁呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。能通過濾菌器、可在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖,在自然界分布極為廣泛??蓪θ恕游?、植物、昆蟲等致病,造成極大危害。 支原體的種類有:Mycoplasma arginin(精氨酸支原體)、Mycoplasma hyosynoviae(豬滑液支原體)、Mycoplasma gateae(貓支原體)、Mycoplasma orale(口腔支原體)、Mycoplasma salivarium(唾液支原體)、Mycoplasma auris(耳支原體)、Mycoplasma cloacale(泄殖腔支原體)、Mycoplasma alkalescens(產(chǎn)堿支原體)、Mycoplasma spermatophilum(嗜精支原體)、Mycoplasma fermentans(發(fā)酵支原體)、Mycoplasma hyopneumoniae(豬肺炎支原體)、Mycoplasma edwardii(愛德華氏支原體)、Mycoplasma primatum(類人猿支原體)、Mycoplasma opalescens(乳白色支原體)、Mycoplasma pulmonis(肺支原體)、Mycoplasma collis(希爾氏支原體)、Mycoplasma mobile(運(yùn)動支原體)等。
支原體對細(xì)胞的影響,主要從兩方面考慮:一方面是對細(xì)胞的直接影響,細(xì)胞被支原體污染后,增殖緩慢,部分細(xì)胞變圓,從瓶壁上脫落,部分細(xì)胞雖然表面變化不十分明顯,實(shí)際上潛伏著多方面的危險(xiǎn);另一方面,支原體可以通過消耗培養(yǎng)基中的精氨酸,抑制細(xì)胞DNA、RNA的合成,降低細(xì)胞的抵抗力。總之,支原體感染會對細(xì)胞造成的影響是多方面的:包括代謝、免疫或生化特性、生長狀況、酶的作用途徑、細(xì)胞膜的組成、染色體結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)染效率、以及細(xì)胞存活等多方面的改變。
Lonza發(fā)光法—MycoAlert支原體檢測試劑盒 美國Lonza MycoAlert支原體檢測試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性,進(jìn)行選擇性的生物化學(xué)檢測。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作,能靈敏地檢測出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解,然后釋放出來的酶與支原體檢測試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng),將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過測量樣品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一個(gè)比率,該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在,第二次讀數(shù)相對于第一次讀數(shù)就沒有增加;如果酶與底物進(jìn)行特異性反應(yīng),就會導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測到,其公式如下: Luciferase ATP + Luciferin + O2 —> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT
這個(gè)反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C~22°C)進(jìn)行的,也是熒光素酶反應(yīng)的最佳溫度。 在支原體檢測試劑盒的檢測原理中,最后通過分光光度計(jì)讀數(shù),由于發(fā)出光的強(qiáng)度與ATP的濃度成線性關(guān)系,因此可檢測支原體的污染問題。
Lonza支原體檢測試劑盒特點(diǎn):
1.快速--20分鐘就可以得到結(jié)果。 2.通用—可檢測所有的支原體或者無膽甾原體。 3.高敏感度--可檢測極少量的支原體。 4.簡易--僅混合2種試劑和您的樣品,將2種讀數(shù)放到照度計(jì)上就可以得到確切結(jié)果。 5.完整--試劑盒包括檢測用所需要的全部試劑。
相關(guān)產(chǎn)品:
新一代MycoAlert Plus 支原體檢測試劑盒: 與第一代MycoAlert支原體檢測試劑盒相比有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。
適合檢測樣品: 懸浮細(xì)胞上清液 未啟用的培養(yǎng)基 10%-20%FCS or FBS L-谷氨酰胺 青霉素-鏈霉素混合物 中性胰蛋白酶(1:2稀釋) 慶大霉素/兩性霉素B
相關(guān)產(chǎn)品:
MycoZap™支原體去除試劑盒(MycoZap™ Mycoplasma Elimination Kit)
特征: 簡單--只需要簡單的將試劑加入到您的培養(yǎng)基中 植物花螺原體和蟲原體
相關(guān)產(chǎn)品:
北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司
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