MP公司 土壤DNA試劑盒 現(xiàn)貨促銷(xiāo) http://kjhfd.cn/a/gb2312/info/2014/0914/5352.html
一般提取DNA的原理基于這樣幾個(gè)步驟：1. 濃縮樣品（用詞不是很準(zhǔn)確），主要的意思就是通過(guò)離心、過(guò)濾等手段將樣品（比如土壤中的微生物、植物的根細(xì)胞等）收集到一起。2. 通過(guò)物理、化學(xué)或者兩者兼而有之的手段，破碎樣品，使目的DNA釋放出來(lái)。3. 將雜質(zhì)去除。4. 清洗DNA溶液。5. 離心沉淀DNA。
以提取土壤中樣品為例，簡(jiǎn)要說(shuō)一下。
1. 將土樣與緩沖液混合均勻，然后離心去上清，留下的沉淀再次沖洗（或者不沖洗），目的就是要初步去除土樣中的雜質(zhì)等。
2. 通過(guò)物理（比如超聲波、玻璃珠-振蕩、反復(fù)凍融）、或者化學(xué)（比如溶菌酶、表面活性劑等）等方法來(lái)破碎細(xì)胞，使目的DNA釋放到溶液中。
3. 一般采用化學(xué)試劑，來(lái)去除溶液中的雜質(zhì)蛋白等物質(zhì)，抽提DNA。可反復(fù)操作，使DNA更純（但是需要注意的是，抽提次數(shù)過(guò)多，會(huì)損失DNA，具體要看自己試驗(yàn)的需要）
4. 使用醇類(lèi)物質(zhì)，低溫下沉淀DNA（一般是放在-20℃）
5. 離心取沉淀，然后用無(wú)菌純水（或者TE緩沖液）來(lái)復(fù)溶DNA。
以上說(shuō)的是不用試劑盒提取DNA的基本操作以及原理，推到試劑盒提取的上面，原理是一樣的。
試劑盒原理是在特定溶液環(huán)境下（高鹽、低pH)使核酸吸附在固相介質(zhì)（一般是硅膠膜）上，洗滌去除雜質(zhì)后，再改變?nèi)芤涵h(huán)境使DNA溶解到純水或TE中。
試劑盒嚴(yán)格來(lái)說(shuō)也分好多種，經(jīng)典的是離心柱的，就是把硅膠膜固定在離心管中，類(lèi)似于超濾膜，用離心力或者負(fù)壓讓液體通過(guò)硅膠膜，核酸就留在膜上。在經(jīng)過(guò)洗滌、洗脫的步驟得到核酸。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短，現(xiàn)在也能達(dá)到很高的質(zhì)量，價(jià)格也不貴。缺點(diǎn)是不易放大，需要多次離心。
基本步驟是先使樣本裂解，在特定溶液中通過(guò)離心流過(guò)硅膠膜，再經(jīng)過(guò)幾次洗滌，最后加上洗脫液，離心后核酸就溶解到洗脫液中。具體的你可以根據(jù)你自己的需要到網(wǎng)上查一下說(shuō)明書(shū)，現(xiàn)在做試劑盒公司的很多，步驟大同小異。
試劑盒也不是一定很便宜，對(duì)一些難度高（病毒核酸、法醫(yī)樣本核酸）或者要求高（去內(nèi)毒素）的用途也比較貴。還有一種磁珠法提取，不需要離心，易于放大，可以用于自動(dòng)化操作。
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