Hepa-Ab XG000/XG001/XG002
肝臟組織活檢中用于免疫組化檢測(cè)的肝細(xì)胞癌(HCC)抗體
肝癌是世界上最常見的致命癌癥之一,在各種癌癥中發(fā)病率居第四,大部分患有肝癌的病人都在作出診斷后的一年之內(nèi)死亡,并且在以往的20多年里死亡率都沒有下降。一部分原因是現(xiàn)有的診斷方法并不是很有效,僅僅是對(duì)于惡化的晚期癌癥檢測(cè)有作用。
對(duì)早期肝癌的檢測(cè)可有效的提高對(duì)這種疾病的預(yù)后。隔離計(jì)劃應(yīng)包括慢性乙肝攜帶者、肝硬化癥和丙肝患者在內(nèi)的危險(xiǎn)病人,但是現(xiàn)有的肝癌血清標(biāo)志諸如甲胎蛋白AFP和DCP缺乏足夠的檢測(cè)特異性和靈敏性。
肝細(xì)胞抗體Hep-Ab是一種檢測(cè)鱗狀細(xì)胞癌抗原變異體(SCCA1、SCCA2、SCCA-PD)的免疫組織化學(xué)試劑盒。SCCA變異體在進(jìn)行性腫瘤轉(zhuǎn)化的肝細(xì)胞內(nèi)會(huì)超常表達(dá)[1-3],SCCA變異體免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示所有外科手術(shù)時(shí)切除的肝癌腫瘤樣本中均呈反應(yīng)陽性,而正常肝臟中則檢測(cè)不到SCCA變異體[3,4]。如FIG.1所示,根據(jù)檢測(cè)到的陽性肝細(xì)胞百分比,可將Hepa-Ab的著色歸入三個(gè)不同的等級(jí)中(或分為三類:Score1,Score2,Score3):
Score3顯示肝臟組織HCC癌變惡化的一種高度特異性狀況:在HCC的SCCA陽性樣本中有70%呈現(xiàn)Score3 水平著色(或三級(jí)著色);對(duì)應(yīng)于肝硬化和慢性肝炎樣本中的18%和12%(Fig.2)。
Hepa-Ab可用于肝臟樣本的HCC體外診斷[3-4],并能用于人工或自動(dòng)化免疫組織化學(xué)檢測(cè)技術(shù)。
肝細(xì)胞抗體Hepa-Ab對(duì)確診肝癌的其他方法起輔助作用,并使HCC的診斷獨(dú)立于病因?qū)W之外,因而更為簡便(FIG.3)。其他一些腫瘤標(biāo)志物諸如KI-67、P53、PCNA的特異性和靈敏性均不理想,僅用于識(shí)別肝臟組織中的增殖細(xì)胞,相比之下, Hepa-Ab 具有更高的檢測(cè)靈敏度和特異性。
在受損肝臟組織(包含肝硬化癥或慢性肝炎患者的肝臟組織)中通過Hepa-Ab著色可以觀察到異常肝組織細(xì)胞。在肝硬化癥和慢性肝炎患者中肝臟細(xì)胞異常發(fā)生和肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)緊密相關(guān)。
在免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中,Hepa-Ab抗體與抗原的結(jié)合比MIB-I抗體更強(qiáng),故可識(shí)別更多異常發(fā)生的多核肝細(xì)胞。 (FIG.4).
FIG.4: A.大多數(shù)異常發(fā)生肝細(xì)胞對(duì)胞質(zhì)Hepa-Ab呈強(qiáng)陽性反應(yīng)(50X)B.肝臟異常發(fā)生區(qū)域?qū)IB-I抗體的陽性反應(yīng)(50X)
在常規(guī)人工或自動(dòng)化免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)微量取樣的肝臟進(jìn)行活檢時(shí)(FIG.5),Hepa-Ab使用起來更方便,且比普通外科手術(shù)檢測(cè)方法靈敏度高80%。
FIG.5: 用Hepa-Ab抗體(圖A)及MIB-1抗體(圖B)對(duì)HCC樣本進(jìn)行免疫組化染色(Score 3, 50X)
參考文獻(xiàn):
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5、Pontisso P et al. (2004), Br. J. Cancer, 90(4):833-837
6、Borzio M et al. (1994) J. Hepatology, 20: 117
說明書
抗體: 多克隆抗體
抗體來源: 兔
純度: 親和層析(SCCA變異體-瓊脂糖凝膠柱)純度(>95%)
物理形態(tài): 凍干粉,用1mL的磷酸鹽緩沖液溶解,制成20mM的溶液(PH7.2)
特異性: 純化的重組SCCA
推薦濃度: 加入1mL磷酸鹽緩沖液, 輕輕旋轉(zhuǎn)小瓶直到粉末溶解。推薦的工作液的稀釋倍數(shù)為1:10
儲(chǔ)存方式: 開封前存于4℃。工作液貯存于-20℃,避免反復(fù)凍溶,使用時(shí)新鮮配制
步驟簡要說明:
適用于福爾馬林固定的石蠟包埋或冷凍組織
除去內(nèi)源性生物素和酶活
高溫抗原暴露技術(shù)
封閉非特異性蛋白的結(jié)合
加入Hepa-Ab于25 ℃孵育1小時(shí)
標(biāo)準(zhǔn)ABC技術(shù)
代碼:XG000 50 Determinations
代碼:XG001 100 Determinations
代碼: XG002 300 Determinations
限于外用
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